Google+

Rechercher dans ce blog

Devenez apiculteur amateur produisez votre propre miel

RENSEIGNEZ-VOUS / INSCRIVEZ-VOUS

Cours de fin février à fin juin, les samedi de 14 heure à 16 heure 30.
Lieu dit : soit la mine Cap Garonne, route du Bau Rouge, Le Pradet ou le bois de courbebaisse près de l'église.
La cotisation est de 120 € d'inscription pour 2018. l'adhésion est valable du 1er Janvier au 31 décembre.

pour nos adhérents : anciens et amis la cotisation reste à 50 €

Inscription pour la session 2018 courant janvier 2018


Rucher Pédagogique du Pradet ouvert aux écoles

Le Rucher Pédagogique du Pradet est situé dans le bois de Courbebaisse, centre ville à droite de l'église: 80 rue Jospeh Lantrua. Réservé aux groupes scolaires.

Nous recevons les enfants du lundi au vendredi de 8h30 à 12h et de 13h30 à 17h, cout de la visite 5,50€ par enfant, plus 1€50 avec atelier bougie, gratuit pour les accompagnateurs.

Ouverture courant Mars, 2018
Prenez rendez-vous dès janvier

Port 07 83 01 81 73 Jean-Pierre
ou 06 49 37 74 99 Guillaume
rucherpedagogiquepradet@sfr.fr


vendredi 20 février 2009

Nosemose; parasite de l'abeille mellifère adulte

Le microsporidium Nosema apis (Zander) est un parasite de l'abeille mellifère adulte qui envahit les cellules épithéliales du ventricule. Les infections sont acquises par l'absorption de l'alimentation ou des spores au cours de toilettage. La maladie survient dans le monde entier, mais les essais sur les abeilles peuvent contribuer à prévenir la propagation de l'infection et ainsi ne pas affecter les colonies d'abeilles.



Le parasite envahit la région postérieure du ventricule, donnant lieu à un grand nombre de spores dans un court laps de temps. Le parasite est omniprésent et se produit dans en plus grand nombre au printemps quand il ya une augmentation du couvain. La maladie se transmet chez les abeilles via l'ingestion de matières contaminées dont les peignes, l'eau, et par trophallaxie; les magasins de miel et les abeilles broyées infectées peuvent également jouer un rôle dans la transmission de la maladie. Les spores sont expulsés avec les fèces où ils peuvent conserver leur viabilité pendant plus de 1 an. Les spores peuvent aussi rester infectieux après immersion dans le miel et dans les cadavres d'abeilles infectées, mais ils risquent de perdre la viabilité après 3 jours lorsque submergée dans le miel à la température de la ruche. L'importance relative des fèces, le miel et les cadavres de réservoirs de spores infectieux n'est pas totalement élucidé. Cependant, il semble probable que la contamination fécale de la cire, en particulier dans les peignes utilisés pour l'élevage du couvain, la ruche ou d'autres surfaces intérieures, fournit suffisamment d'inoculum pour Nosema Apis à être transmis avec succès à la prochaine génération d'abeilles. Les spores sont inactivées par l'acide acétique ou par chauffage à 60 ° C pendant 15 minutes. Pour être efficaces, ces traitements, qui inactivent les spores sur les surfaces de la ruche, doivent être combinés avec l'antibiotique fumagillin dans l'alimentation des colonies pour supprimer les infections qui vivent parmi les abeilles.

Identification de l'agent: Dans certains cas aigus, des marques brunes, fécales, sont visibles sur le peigne, avec les abeilles malades ou mortes dans le voisinage de la ruche. Toutefois, la majorité des colonies ne montrent pas de signes évidents d'infection, même lorsque la maladie est suffisante pour causer d'importantes pertes lors de la production de miel et la pollinisation. Pendant l'hiver, il peut y avoir une augmentation de la mortalité des abeilles. Dans les abeilles, le ventricule, qui est normalement de brun, est alors blanc et très fragile. This method can help to distinguish Nosema Apis from other microbes found in bees. L'examen microscopique des homogenates du contenu de l'abdomen des abeilles atteintes, dévoileront les spores de Nosema ovale, qui sont d'environ 5-7 par 3-4 μm avec une pointe sombre. Leur contenu interne ne peuvent être distingués lorsque les spores frais sont en utilisant la microscopie à lumière incandescente ou à contraste de phase. Après coloration à la teinture Giemsa, les spores Nomesa ont un aspect distinct, avec une paroie épaisse et sans tâche, colorée en traits bleus internes. Les noyaux dans les spores ne sont pas visibles. Cette méthode peut aider à distinguer Nosema Apis d'autres microbes trouvés dans les abeilles.

L'apparance des spores Nosema peut être confondu avec des cellules de levure, les spores fongiques, les graisses et les calcaires des organismes ou des kystes Malpighamoeba mellificae. Ces derniers sont similaires en taille aux spores Nosema, soit 6-7 μm de diamètre, mais sont complètement sphériques et de forme ovale.

Les identifications positives ne peuvent être effectués que par l'observation typique de spores dans le ventricule ou les fèces. Une très légère infection peut ne pas être évidente. L'ampleur de l'infection est déterminée par le dénombrement des spores sur la grille d'un microscope, le calcule a proximatif du nombre moyen de spores par zone ainsi que le nombre de spores par abeille.

Les tests sérologiques: Il n'ya pas de tests sérologiques applicables.

Exigences pour les vaccins et produits biologiques de diagnostic: Il n'ya pas de produits biologiques disponibles.


A. INTRODUCTION

Le microsporidium Nosema Apis (Zander) est un parasite protozoaire exclusif pour les cellules épithéliales du ventricule des abeilles adultes et la maladie survient dans le monde entier (15). L'infection se produit par l'ingestion de spores dans l'alimentation (5, 13), par trophallaxie (19) ou peut-être après le toilettage des poils du corps (6, 10, 17).

Le tube polaire de la spore est renversé et pénètre la matrice péritrophique de l'intestin, en particulier dans la région postérieure de la ventricule. Le sporo-plasma passe le tube et pénètre dans le cytoplasme des cellules épithéliales, où il se reproduit. Des autoinfections peuvent se produire en même temps que de nouvelles infections. Après un court intervalle, les spores se développent en grandes quantités. Les abeilles infectées sont incapables de voler et se sont révélent infectées par un maximum de 500 millions de spores.

Le parasite est omniprésent et se multiplie à un taux spécifique tout au long de l'année, avec un nombre maximum survenant au cours du printemps, qui coïncide avec l'augmentation du couvain (17, 20). En hiver, les spores sont rares à trouver, ou ne le sont que dans les abeilles très affectées.
Toute les défenses naturelles de défense par une colonie contre une forte infection par le parasite dépend de la taille de la colonie, ainsi que sur les conditions météorologiques qui prévalaient au début de l'automne de l'année précédente (18). Si ces conditions sont défavorables, l'espérance de vie globale de la colonie est réduite. Cela peut conduire à la mort prématurée des abeilles durant l'hiver ou au début du printemps. Dans un cas typique d'une colonie s'épuisant en raison d'une infection par Nosema, la reine peut être observée, entourée de quelques abeilles, en train d'essayer, confusément, de couver le couvain qui est déjà scellé.

Dans les déjections fécales, les spores peuvent conserver leur viabilité pendant plus d'1 an (3). Les spores peuvent aussi demeurer viable pour un maximum de 4 mois après l'immersion dans le miel (21) et pour un maximum de 4,5 ans dans les cadavres d'abeilles infectées (12). Les spores peuvent perdre viabilité après seulement 3 jours lorsque immergés dans du miel à la température de la ruche (14). Il est probable que la contamination fécale de la cire, en particulier dans les peignes utilisés pour l'élevage du couvain, la ruche ou d'autres surfaces intérieures, fournit suffisamment d'inoculum pour la Nosema Apis pour être transmis avec succès à la prochaine génération d'abeilles. L'importance relative des fèces, le miel et des cadavres comme réservoirs de spores infectieux n'est pas encore complètement élucidé, et il semble que la température peut avoir un effet marqué sur les taux auxquels les spores perdre viabilité, quel que soit leur support (14).

Les spores peuvent être tuées par chauffage de l'équipement de la ruche ou les outils à une température d'au moins 60 ° C pendant 15 minutes. Les peignes peuvent être stérilisés par chauffage à 49 ° C pendant 24 heures (8). Les vapeurs d'une solution contenant au moins 60% d'acide acétique va rendre inactif tous les spores, en quelques heures, en fonction de la concentration; des concentrations plus élevées sont encore plus efficaces et vont tuer les spores en quelques minutes (2, 9). Ces procédures relèvent de la compétence des autorités nationales de contrôle à l'aide de protocoles qui varient d'un pays à l'autre. La désinfection peut être effectuée, par exemple, par la mise en solution d'acide acétique dans des cuvettes ou sur des éponges qui peuvent s'imprégner de l'état liquide. Suite à la désinfection après une épidémie, tous les peignes doit être bien aérée pendant au moins 14 jours avant l'utilisation. L'éradiction de la maladie Nosema peut également être obtenu par l'alimentation d'un antibiotique, fumagillin (également connu sous le nom de Fumidil B), dans le sirop de sucre de la colonie. On pense au travail, en empêchant le parasite de se multiplier dans les abeilles adultes qui ont ingéré des antibiotiques. Le moyen le plus efficace de contrôle de la maladie Nosema est réalisé en combinant la stérilisation du matériel utilisant la chaleur ou à l'acide acétique avec le traitement fumagillin (8).

B. Les techniques de diagnostic

1. Identification de l'agent

Dans les formes graves de l'infection, en particulier au début du printemps, les marques brunes fécale peuvent être visibles sur le peigne (4). À l'entrée de la ruche, des abeilles malades ou mortes peuvent être observées, même si d'autres causes, telles que les intoxications par les pesticides, doivent être éliminées en premier si tel est le cas. Pendant l'hiver, les abeilles infectées par Nosema peuvent devenir des colonies d'abeilles fortement entamées ou disparaître purement et simplement. La majorité des colonies d'abeille infectées Nosema paraîtra normal, sans signes évidents de maladie, même lorsque la maladie est suffisante pour causer d'importantes pertes dans la production de miel et l'efficacité de la pollinisation (1, 11). Un bon diagnostic ne pourra être effectué que par l'examen microscopique du ventricule de l'abeille adulte. Pour diagnostiquer une infection Nosema, la face postérieure paire des segments abdominaux est enlevée avec une pince pour révéler la ventriculus complète, avec les malpighian tubules, l'intestin grêle et le rectum. Le ventricule est habituellement brun mais, suite à une infection par Nosema, devient blanc et très fragile. Toutefois, cet aspect peut être donné par d'autres causes de trouble intestinal, comme par exemple l'alimentation de produits indigestes, tels que le sirop contenant de la levure en croissance active. Pour un diagnostic fiable, il faut examiner un échantillon d'un certain nombre d'abeilles.

A) Microscopie
Il est nécessaire de tenter de faire la distinction entre une infection Nosema et une infection causée par Malpighamoeba mellificae (16). Il ya très souvent une indication de la dysenterie dans une infection Nosema. Dans une infection Malpighamoeba mellificae mellificae infection, il peut y avoir une diarrhée, souvent d'une couleur jaune soufre et avec une odeur distincte. Les caractéristiques des kystes Malpighamoeba mellificae sont décrites plus loin. Des infections mixtes, secondaires peuvent survenir (17). D'une manière simple, non-quantitative la méthode de détection de l'infection Nosema est la suivante: l'échantillon d'abeilles devrait être obtenue a l'entrée de la ruche afin d'éviter l'échantillonnage des individus âgés de moins de 8 jours, ce qui conduirait à de «faux négatifs», car aucun des spores du protozoaire en question serait déterminée. Au moins 60 abeilles, devraient être collectées en vue de détecter 5% de malades et 95% saines (10). Avant de les envoyer au laboratoire, les abeilles devraient être fixées et imbibées de 4% de formol afin de les empêcher de décomposer et d'améliorer leur accueil et l'organisation en laboratoire. L'abdomen de l'abeille à examiner doit être séparé la tête en bas dans 2-3 ml d'eau. Trois gouttes de la suspension sont placés sur une lamelle pour un examen au microscope à grossissement x400, luminescent ou à contraste de phase optique. Il s'agit d'une légère simplification de la méthode originale Cantwell (7). Les spores sont environ 5-7 μm de long et 3-4 μm de large. Ils sont complètement ovoïdes avec une pointe sombre. Leur contenu, qui se compose d'un noyau, et d'un tube polaire sporo-plasmique, ne peut pas être vu. Les teintures ne sont généralement pas nécessaires.

Nosema spores doivent être différenciées de cellules de levure, les spores fongiques, les graisses et les organismes calcaires, et des kystes Malpighamoeba mellificae, qui sont sphériques et d'environ 6-7 μm de diamètre.

Une fois séchées à l'air, des souillures d'éthanol du tissu infecté sont souillées avec la tache de Giemsa (10% dans la solution tampon de phosphate de 0.02 M) pendant 45 minutes. Les spores Nosema Apis auront un aspect distinct, avec des paroies épaissse sans tâche bleue et un intérieur indistinct, sans noyaux visibles. Les cellules d'insectes, les spores fongiques et autres protozoaires teintés de cette façon ont généralement des paroies plus minces, le bleu / violet du cytoplasme et des noyaux de couleur magenta.

Afin d'obtenir des précisions, la quantification fiable et signicative des niveaux des infections de Nosema dans les abeilles, un procédé standardisé doit être employé. Un protocole est adapté comme suit:

Un échantillon d'abeilles travailleuses âgées est pris, à partir duquel les abdomens de dix individus sont macérés dans 5 ml d'eau à l'aide d'un mortier et d'un pilon. Lorsque les morceaux de tissus sont devenus de couleur amende, la suspension est filtrée par deux couches de mousseline (tissu lâchement tissé mince de coton) dans un entonnoir menant à un tube de centrifugeuse gradué. Un second 5 ml d'eau est utilisé pour rincer le pilon, puis tourbillonner autour de l'intérieur du mortier et verser le sous-échantillon dans l'entonnoir. Le niveau d'eau est égalisé dans les tubes et les suspensions sont centrifugés pendant 6 minutes à 800 g. Les surnageants sont décantés et les tubes sont remplis à l'échelle de 10 ml. En utilisant des pipettes jetables et une poire en caoutchouc, les granules sont en suspension par réabsorption, et éjectés par force centrifuge. Lorsque la solution semble être homogène, un échantillon est prélevé pour combler le volume calibré sous la lamelle d'un hémocytomètre (chambre de compte de cellules de sang). Après quelques minutes, les spores se sont installés au fond de la chambre. Les spores Nosema apparaissent transparents avec une pointe très sombre distincte de 5-7 μm de long et 3-4 μm de large.Ils sont mieux perçu à l'aide d'un grossissement de x400 et d'un champ lumineux ou un contraste de phase optique. Le nombre de spores dans chaque carré est compté. Si un spore litigieux se trouve sur le bord d'un carré, compter seulement les spores qui chevauchent la gauche et les bords supérieurs de la place, pas à droite ni en bas. Une spore de Nosema, observée dans le secteur qui couvre le quadrillage (4000 petites carrés), est égale à une moyenne de 4 millions de spores par abeille. Si aucune spore n'est aperçu, le résultat devrait être désigné «non détecté», mais cela ne signifie pas que les abeilles ne sont pas infectés. Les organismes de réglementation se prononceront sur le niveau d'infection efficace.

Une méthode de laboratoire pour la détection simultanée de spores de Nosema et des kystes Malpighamoeba mellificae consiste en l'examen individuel des colonies d'abeilles en utilisant 30-60 individus par colonie. Une suspension de l'abdomen des abeilles mortes est préparé par broyage avec 5-10 ml d'eau, le volume d'eau variant selon le nombre et l'état des abeilles. La suspension doit être filtrée afin d'enlever les débris qui pourraient interférer avec l'examen, en premier lieu par le biais d'un filter de 100 μm, puis un de 40 μm. Des parties de la tubule malpighian passent par le filtre de 100 μm, mais elles sont collectées sur le filtre de 40 μm. Ils sont placés sur une diapositive ou chambre de comptage bactérien et examinés au grossissement x400. Seuls quelques tubes sont remplis de kystes Malpighamoeba mellificae après une infection. La structure normale des tubules malpighian n'est pas visible dans ce cas. Seuls les kystes dans les tubules malpighian sont pris en compte pour un résultat positif, parce que kystes Malpighamoeba mellificae sont souvent confondus avec les spores fongiques et les cellules de levure.

b) Culture
Il n'existe pas encore de méthodes pour la culture de ces organismes.

2. Les tests sérologiques

Il n'existe pas de tests sérologiques.


C. Exigences pour les vaccins et les produits biologiques de diagnostic

Aucun produits biologiques disponibles.



REMERCIEMENTS

Les auteurs tiennent à remercier le docteur F. Gnädinger pour ses précieux conseils.


REFERENCES


1. Anderson D.L. & Giacon H. (1992). Reduced pollen collection by honey bee (Hymenoptera: Apidae) colonies infected with Nosema apis and sacbrood virus. J. Econ. Entomol., 85, 47-51.

2. Bailey L. (1957). Comb fumigation for Nosema disease. Am. Bee J., 97, 24-26.

3. Bailey L. (1962). Bee diseases. In: Report of the Rothamsted Experimental Station for 1961, Harpenden, UK, 160-161

4. Bailey L. (1967). Nosema apis and dysentery of the honey bee. J. Apic. Res., 6, 121-125.

5. Bailey L. (1981). Honey Bee Pathology. Academic Press, London, UK.

6. Bulla (1977). In: Comparative Pathobiology. Vol. 1: Biology of Microsporidia (1976); Vol. 2: Systematics of the Microsporidia, Lee A. & Cheng T.C., eds. Plenum Press, New York, USA, and London, UK.

7. Cantwell G.E. (1970). Standard methods for counting nosema spores. Am. Bee J., 110, 222-223.

8. Cantwell G.E. & Shimanuki H. (1970). The use of heat to control Nosema and increase production for the commercial beekeeper. Am. Bee J., 110, 263.

9. de Ruiter A. & van der Steen J. (1989). Disinfection of combs by means of acetic acid (96%) against Nosema. Apidologie, 20, 503-506.

10. Fries I. (1988). Contribution to the study of Nosema disease (Nosema apis Z.) in honey bee (Apis mellifera L.) colonies. Rapport 166, Sveriges Landbruksuniversitet, Institutionen för husdjurens utfodring och värd, Uppsala, Sweden.

11. Goodwin M., Ten Houten A., Perry J. & Blackmann R. (1990). Cost benefit analysis of using fumagillin to treat Nosema. NZ Beekeeper, 208, 11-12

12. Kulikov N.S. & Akramovsky M.N. (1961). Sroki ziznesposobnosti spor mosey u pcel. Pcelovodstov, 38, 46.

13. L'Arrivee J.C.M. (1965). Sources of nosema infection. Am. Bee J., 105, 246-248.

14. Malone L.A., Gatehouse H.S. & Tregidga E.L (2001). Effects of time, temperature and honey on Nosema apis, a parasite of the honey bee (Apis mellifera). J. Invertebr. Pathol., 77, 258-268.

15. Matheson A. (1996). World bee health update 1996. Bee World, 77, 45-51.

16. Ministry of Agriculture, Fisheries and Food (1984). Nosema and Amoeba. Advisory Leaflet 473, HMSO, UK.

17. Morgenthaler D. (1939). Die ansteckende Frühjahrsschwindsucht (Nosema-Amoeben-Infection) der Bienen. Erweiterter Sonderdruck aus der Scheizerischen Bienenzeitung Heft 2, 3 und 4.

18. Steche W. (1985). Revision of Zander & Bottcher. Nosematose. In: Krankheiten der Biene, Handbuch der Bienenkunde.

19. Webster T.C. (1993). Nosema apis spore transmission among honey bees. Am. Bee J., 133, 869-870.

20. Weiser J. (1961). Die Mikrosporidien als Parasiten der Insekten. Verlag Paul Pavey, Hamburg and Berlin, Germany.

21. White G.F. (1919). Nosema Disease. United States Department of Agriculture Bull., No. 780, 54 pp.


* *

NB: Traduction d'un manuel de l'Organisation Mondiale de la Santé Animale, aussi dénommée l'OIE.